Modificación de una técnica para extracción de ADN de glóbulos blancos humanos
Titulo:

Modificación de una técnica para extracción de ADN de glóbulos blancos humanos
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Sumario:

Introducción: Las técnicas modificadas de extracción de ADN a partir de glóbulos blancos, permiten obtener un buen rendimiento en cantidad y pureza de ADN extraído. Objetivo: Modificar la técnica de extracción de ADN para economizar tiempo y reactivos utilizados. Materiales y Métodos: Fueron modificados los pasos de la técnica de extracción de Gustafson (1987). La cantidad de ADN producida fue calculada por espectrofotometría. La pureza del ADN extraído fue evaluada mediante amplificación con PCR y comprobación en geles de agarosa. Resultados: Las modificaciones que proponemos al método de Gustafson (1987) representan un ahorro económico del 70% y en tiempo de 6 horas aproximadamente.  Conclusión: El m... Ver más

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2462-960X

Osorio, José Henry

Quenán, Yoccner Edilson

UNIVERSIDAD DE CALDAS

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Colombia

métodos de extracción

ácidos nucleicos

Revista Biosalud - 2012

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Modification of a DNA extraction technique from white human blood cells
Introducción: Las técnicas modificadas de extracción de ADN a partir de glóbulos blancos, permiten obtener un buen rendimiento en cantidad y pureza de ADN extraído. Objetivo: Modificar la técnica de extracción de ADN para economizar tiempo y reactivos utilizados. Materiales y Métodos: Fueron modificados los pasos de la técnica de extracción de Gustafson (1987). La cantidad de ADN producida fue calculada por espectrofotometría. La pureza del ADN extraído fue evaluada mediante amplificación con PCR y comprobación en geles de agarosa. Resultados: Las modificaciones que proponemos al método de Gustafson (1987) representan un ahorro económico del 70% y en tiempo de 6 horas aproximadamente.  Conclusión: El método que se propone en el presente trabajo es más económico en tiempo y dinero para la extracción de ADN de glóbulos blancos. Además, el rendimiento en cuanto a la cantidad de ADN producida es superior.
Introduction: The modified techniques for DNA extraction from white blood cells, allow obtaining a good efficiency in the extracted DNA quantity and purity. Objective: To modify the DNA extraction technique in order to save time and necessary reactives. Materials and Methods: Gustafson's /1987) extraction technique steps were modified. The quantity of DNA produced was calculated using spectrophotometry. The DNA purity was assessed through PCR amplification and confirmed using agarose gels. Results: The changes proposed to Gustafson's DNA extraction method, represent 70% savings in money, and a 6 hours savings in time approximately. Conclusion: The method proposed in the present work is more economic in time and money for white blood cells DNA extraction. Also the efficiency as far as quantity of DNA produced is higher.
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Revista Biosalud - 2012
20
25
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Saiki RK, Gelfand DH, Stoffel S, et al. Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase. Science 1988; 239(4839):487-91.
Einsele H, Herbart H, Roller G, et al. Detection and identification of fungal pathogens in blood by using molecular probes. J Clin Microbiol 1997; 35(6):1353-60.
Löffler J, Herbart H, Schumacher U, et al. Comparison of different methods for extraction of DNA of fungal pathogens from cultures and blood. J Clin Microbiol 1997; 35(12):3311-2.
Iwen PC, Hinrichs SH, Rupp ME. Utilization of the internal transcribed spacer regions as molecular targets to detect and identify human fungal pathogens. Med Mycol 2002; 40(1):87-109.
Junqueira L., Carneiro J. Biología celular y molecular. 6.ed. Santiago, Chile: McGraw-Hill Interamericana de Chile Ltda.; 1998. p. 324.
Velasco R. Molecular markers and the DNA extraction. Biotecnología en el Sector Agropecuario y Agroindustrial 2005; 3(1):14-18.
Gustafson S, Proper J, Bowie W, et al. Parameters affecting the yield of DNA from human blood. Analytical biochemistry 1987; 165(2):294-299.
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references Baiget M, Gallano P, Tizzano E. Técnicas de biología molecular. Barcelona: Talleres Gráficos Vigor S.A.; 1995. p. 180.
Saiki RK, Gelfand DH, Stoffel S, et al. Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase. Science 1988; 239(4839):487-91.
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