Titulo:
Efecto del medio extensor y de las curvas de enfriamiento y congelamiento en la célula espermática en caballos criollos colombianos
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Sumario:
El objetivo fue analizar los parámetros de motilidad, vigor, morfología e integridad de membrana plasmática para cada uno de los crioprotectores. Cada eyaculado se dividió en dos alícuotas iguales al azar con variaciones en la adición del crioprotector (dimetilformamida 5% o glicerol 5%) y se congelo por el protocolo de criopreservación, con una curva de enfriamiento de 5ºC durante 120 minutos y exposición a vapor de nitrógeno durante 15 minutos antes de ser sumergido al nitrógeno líquido. La viabilidad espermática (motilidad) fue evaluada mediante el test de termorresistencia, la morfología de las células se evalúo fijando el semen en formol salino y la integridad de la membrana plasmática de la cola del espermatozoide mediante el test hi... Ver más
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Efecto del medio extensor y de las curvas de enfriamiento y congelamiento en la célula espermática en caballos criollos colombianos Effect of the extender medium and the cooling and freezing curves over the sperm cell in Colombian creole horses El objetivo fue analizar los parámetros de motilidad, vigor, morfología e integridad de membrana plasmática para cada uno de los crioprotectores. Cada eyaculado se dividió en dos alícuotas iguales al azar con variaciones en la adición del crioprotector (dimetilformamida 5% o glicerol 5%) y se congelo por el protocolo de criopreservación, con una curva de enfriamiento de 5ºC durante 120 minutos y exposición a vapor de nitrógeno durante 15 minutos antes de ser sumergido al nitrógeno líquido. La viabilidad espermática (motilidad) fue evaluada mediante el test de termorresistencia, la morfología de las células se evalúo fijando el semen en formol salino y la integridad de la membrana plasmática de la cola del espermatozoide mediante el test hiposmótico. Al evaluar el semen pos descongelación no se observó diferencia significativa (p> 0.05) entre los dos crioprotectores respecto a los parámetros evaluados. Los resultados nos permiten concluir que la utilización del medio extensor INRA 82 modificado con azúcares asociado a leche descremada con adición del 2% de yema de huevo, y a una curva de enfriamiento moderada de 120 minutos a 5ºC muestran efectos benéficos en los parámetros espermáticos pos descongelamiento de forma independiente al crioprotector utilizado en los caballos criollos colombianos. The aim was to analyze the parameters of motility, vigor, morphology and integrity of the plasma membrane for each of the cryoprotectans. Each eyaculated was divided into two equal aliquots. One half received dimethylformamide (5%) and the other half received glycerol (5%) as cryoprotectans. The protocol was performed with a cooling curve of 5ºC for 120 minutes, and exposure to nitrogen vapor for 15 minutes before being submerged in liquid nitrogen. Sperm viability (motility) was assessed by a thermal resistance test, the morphology of cells was evaluated by setting the semen in saline formalin and the integrity of the plasma membrane of the sperm tail by hyposmotic test. In respect to the parameters the post-thawing evaluation of the semen displayed no significant difference (p>0.05) between the two cryoprotectans. The results allow us to conclude that the use of extensor medium INRA 82, modified with sugar associated with skim milk and addition of 2% egg yolk and moderate cooling curve of 5ºC for 120 minutes shows a beneficial effect on sperm parameters in post-thaw period independently of the cryoprotectant used in the colombian criollo horses. Pérez Osorio, Jair Otero Arroyo, Rafael Cardona-Alvarez, José Ospitia, Paula González, Alejandra Paredes Cañón, Astri Cryopreservation dimethylformamide equine glycerol semen Criopreservación equinos dimetilformamida glicerol semen. 10 1 Núm. 1 , Año 2018 : RECIA 10(1):ENERO-JUNIO 2018 Artículo de revista Journal article 2018-01-10T00:00:00Z 2018-01-10T00:00:00Z 2018-01-10 application/pdf Universidad de Sucre Revista Colombiana de Ciencia Animal - RECIA 2027-4297 https://revistas.unisucre.edu.co/index.php/recia/article/view/631 10.24188/recia.v10.n1.2018.631 https://doi.org/10.24188/recia.v10.n1.2018.631 spa https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ 61 67 ALVARENGA, M.; PAPA, F.; LEÃO, K.; LANDIM, F.; MEDEIROS, A.; GOMES, G. 2003. The use of alternative cryoprotectans for freezing stallion semen. En: Proceedings of a workshop on transporting gametes and embryos. Havemeyer Foundation. USA. ALVARENGA, M.; PAPA, F.; LANDIM, F.; MEDEIROS, A. 2005. Amides as cryoprotetans for freezing stallion semen: A review. Anim Reprod Sci 89:105-113. ARIFIANTINI, R.; PURWANTARA, B.; YUSUF, T.; SAJUTHI, D. 2010. Effect of different cryoprotective agents on skim milk and dimitropoulus extender for stallion semen cryopreservation. J Indonesian Trop Anim Agric 35(1): 68-74. BARTH, A.; OKO, R. 1989. Abnormal morphology of bovine spermatozoa. Ames: Iowa University Press. BRASS K. 2001. Inseminación artificial en la especie equina. Biotecnología de la reproducción. INTA. Argentina. BRINSKO, S.; VARNER, D. 1992. Artificial Insemination and Preservation of Semen. Stallion Management. Vet Clinics of North America: Equine Practice 8: 205 - 218. FÜRST, R. 2006. Efeito de diferentes tempos de equilíbrio, taxas de congelamento e concentrações espermáticas na fertilidade do sêmen equino. Universidade Federal de Viçosa. Teses de doutorado. GAO, D.; MAZUR, T.; KLEINHANS, F.; WATSON, P.; NOILES, E.; CRITSER, J. 1992. Glycerol permeability of human spermatozoa and its activation energy. Rev Criobiology 29: 657-667. GOMES, G.; JACOB, J.; MEDEIROS, A.; PAPA, F.; ALVARENGA M. 2002. Improvement of stallion spermatozoa preservation with alternative cryoprotectants for the Mangalarga Marchador breed. Theriogenology 58 (2/4): 277-279. HAMMERSTEDT, R.; GRAHAM, J.; NOLAN, J. 1990. Criopreservation of mammalian sperm: what we ask them to survive. J. Andrology 11: 73-88. HAMMERSTEDT, R. 1992. Artificial insemination using extended liquid semen: An old technology of great value to modern industry. En: 41st Annual National Breeders Roundtable. Southeastern Poultry and Egg Association. Atlanta. JASKO, D. 1994. Procedures for cooling and freezing of equine semen. Ars Veterinaria 10: 156-165. KEITH, S. 1998. Evaluation of new crioprotectants for the preservation of equine semen. Fort Collins: Colorado State University. Tesis de Maestría. MEDEIROS, A.; GOMES, G.; CARMO, M.; PAPA, F.; ALVARENGA, M. 2002. 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El objetivo fue analizar los parámetros de motilidad, vigor, morfología e integridad de membrana plasmática para cada uno de los crioprotectores. Cada eyaculado se dividió en dos alícuotas iguales al azar con variaciones en la adición del crioprotector (dimetilformamida 5% o glicerol 5%) y se congelo por el protocolo de criopreservación, con una curva de enfriamiento de 5ºC durante 120 minutos y exposición a vapor de nitrógeno durante 15 minutos antes de ser sumergido al nitrógeno líquido. La viabilidad espermática (motilidad) fue evaluada mediante el test de termorresistencia, la morfología de las células se evalúo fijando el semen en formol salino y la integridad de la membrana plasmática de la cola del espermatozoide mediante el test hiposmótico. Al evaluar el semen pos descongelación no se observó diferencia significativa (p> 0.05) entre los dos crioprotectores respecto a los parámetros evaluados. Los resultados nos permiten concluir que la utilización del medio extensor INRA 82 modificado con azúcares asociado a leche descremada con adición del 2% de yema de huevo, y a una curva de enfriamiento moderada de 120 minutos a 5ºC muestran efectos benéficos en los parámetros espermáticos pos descongelamiento de forma independiente al crioprotector utilizado en los caballos criollos colombianos.
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The aim was to analyze the parameters of motility, vigor, morphology and integrity of the plasma membrane for each of the cryoprotectans. Each eyaculated was divided into two equal aliquots. One half received dimethylformamide (5%) and the other half received glycerol (5%) as cryoprotectans. The protocol was performed with a cooling curve of 5ºC for 120 minutes, and exposure to nitrogen vapor for 15 minutes before being submerged in liquid nitrogen. Sperm viability (motility) was assessed by a thermal resistance test, the morphology of cells was evaluated by setting the semen in saline formalin and the integrity of the plasma membrane of the sperm tail by hyposmotic test. In respect to the parameters the post-thawing evaluation of the semen displayed no significant difference (p>0.05) between the two cryoprotectans. The results allow us to conclude that the use of extensor medium INRA 82, modified with sugar associated with skim milk and addition of 2% egg yolk and moderate cooling curve of 5ºC for 120 minutes shows a beneficial effect on sperm parameters in post-thaw period independently of the cryoprotectant used in the colombian criollo horses.
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