Aislamiento e identificación de Lactobacillus contaminantes en una planta colombiana de fermentación alcohólica
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La contaminación bacteriana es un problema continuo en procesos fermentativos, particularmente, en fermentaciones para producción de etanol, donde se utiliza melaza de caña o maíz como materia prima; estos contaminantes son bacterias ácido lácticas, predominando el género lactobacillus, principalmente. Estas bacterias crean un descenso constante del carbono disponible en la materia prima para la conversión a etanol. Compiten por factores de crecimiento necesarios para que la levadura realice su proceso fermentativo; así mismo pueden producir ácido láctico, el cual, inhibe el crecimiento de la levadura, generando una pérdida de dos moléculas de etanol por cada molécula de ácido láctico producido, disminuyendo la productividad y... Ver más
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Aislamiento e identificación de Lactobacillus contaminantes en una planta colombiana de fermentación alcohólica Isolation and identification of contaminant Lactobacillus in a colombian alcohol fermentation plant La contaminación bacteriana es un problema continuo en procesos fermentativos, particularmente, en fermentaciones para producción de etanol, donde se utiliza melaza de caña o maíz como materia prima; estos contaminantes son bacterias ácido lácticas, predominando el género lactobacillus, principalmente. Estas bacterias crean un descenso constante del carbono disponible en la materia prima para la conversión a etanol. Compiten por factores de crecimiento necesarios para que la levadura realice su proceso fermentativo; así mismo pueden producir ácido láctico, el cual, inhibe el crecimiento de la levadura, generando una pérdida de dos moléculas de etanol por cada molécula de ácido láctico producido, disminuyendo la productividad y ocasionando pérdidas económicas. En este estudio, se colectaron muestras en una destilería colombiana de materia prima, levadura utilizada para el inóculo y cinco tanques de fermentación a diferentes tiempos, donde las bacterias ácido lácticas contaminantes fueron cuantificadas, aisladas y caracterizadas polifásicamente, utilizando métodos fenotípicos y genotípicos. Se emplearon pruebas bioquímicas de microbiología clásica, como método fenotípico y la técnica de pcr (reacción en cadena de la polimerasa), como método genotípico. Al cuantificarlas, se evaluó su comportamiento y su impacto en la eficiencia del proceso. Se observó recuentos altos de bacterias ácido lácticas en los tanques de fermentación; también se hallaron estas bacterias en la materia prima y levadura, lo que sugiere que el proceso tiene varias fuentes de contaminación. Al realizar la identificación polifásica, el género de bacterias más representativas fue lactobacillus. Bacterial contamination is a constant problem in fermentation processes, especially in the production of ethanol where sugar cane or corn molasses is used as raw material. The main contaminants are lactic acid bacteria, predominating, the genus Lactobacillus. These bacteria cause a decrease in the carbon source for the ethanol production. They compete for growth factors, needed by the yeast cells to generate the fermentation process. They also produce lactic acid, an inhibitor of yeast growth, which causes the loss of two molecules of ethanol per molecule of lactic acid produced. This causes a decrease in productivity, thus originating economic losses. In this study samples were collected from a Colombian distillery, from raw material, yeast used as inoculum and from five fermentation tanks at different moments. The lactic bacteria contaminants were quantified, isolated and characterized using phenotypic and genotypic methods. Biochemical tests of classical microbiology were used as the phenotypic method and PCR (Polimerase Chain Reaction) for the genotypic method. When quantifying the bacteria, their behavior and impact in efficiency was evaluated. High counts of lactic acid bacteria were observed in fermentation tanks. These bacteria were also found in the raw matter and in the yeast, suggesting the process has several sources of contamination. When performing the polyphasic characterization, the main contaminant was Lactobacillus. Sossa Urrego, Diana Patricia González, Lina María Vanegas, María Consuelo Producción de etanol Contaminación bacteriana Bacterias ácido lácticas Lactobacillus Ethanol production Microbial contamination Lactic acid bacteria Lactobacillus 12 2 Núm. 2 , Año 2009 :Revista U.D.C.A Actualidad & Divulgación Científica. Julio-Diciembre Artículo de revista Journal article 2009-12-31T00:00:00Z 2009-12-31T00:00:00Z 2009-12-31 application/pdf text/html Universidad de Ciencias Aplicadas y Ambientales U.D.C.A Revista U.D.C.A Actualidad & Divulgación Científica 0123-4226 2619-2551 https://revistas.udca.edu.co/index.php/ruadc/article/view/702 10.31910/rudca.v12.n2.2009.702 https://doi.org/10.31910/rudca.v12.n2.2009.702 spa https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ 163 172 ARIAS L., A.F.; ARBELÁEZ S., F.; ORTEGA A., J.D. 2006. Estrategia de desarrollo de biocombustibles: Implicaciones para el sector agropecuario. República de Colombia Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural. República de Colombia. p.9. BAYROCK, D.; INGLEDEW, W. 2004. Inhibition of yeast by lactic acid bacteria in continuous culture: nutrient depletion and/or acid toxicity? J. Industrial Microbiol. & Biotechn. 31:362-368. DENNIS, P.; INGLEDEW, W. 2005. Ethanol production in multistage continuous, single stage continuous, Lactobacillus-contaminated continuous, and batch fermentations. World J. Microbiol. & Biotechn. 21:83-88. DUARTE, R.; BARROS, R.; FACKLAM, R.; TEIXEIRA, L. 2005. Phenotypic and Genotypic Characteristics of Streptococcus porcinus Isolated from Human Sources. J. Clinical Microbiol. 43(9):4592-4601. DUBERNET, S.; DESMASURES, N.; GUÉGUEN, M. 2002. A PCR-based method for identification of lactobacilli at the genus level. FEMS Microbiol. Letters. 214:271-275. GLAZER, A.; NIKAIDO H., 1998. Microbial Biotechnology: Fundamentals of Applied Microbiology. Ed. W.H. Freeman & Co. (USA). p.362-368. GNECCO, J. 2006. Situación de la producción de alcohol en Colombia. Disponible desde Internet en: http://www.ciat.cgiar.org/training/pdf/060315_escenarios_de_produccion_de_etanol_en_colombia.pdf (con acceso 24/09/09). HOLT, J.; KRIEG, N.; SNEATH, P.; STALEY, J.; WILLIAMS, S. 1994. Bergey's Manual of Determinative Bacteriology. Ed. Board (United States of America). p.565, 569. HYNES, S.H.; KJARSGAARD, D.M.; THOMAS, K.C.; INGLEDEW, W.M. 1997. Use of virginiamycin to control the growth of lactic acidbacteria during alcohol fermentation. J. Industrial Microbiol. & Biotechn. 18:284-291. KANDLER, O.; WEISS N. 1984. Regular, Nonsporing Gram-Positive Rods. En: Holt, J.; Sneath, P.; Mair, N.; Sharpe, E. eds. Bergey's Manual of Systematic Bacteriology. Ed. Board. (United States of America). p.1222-1230. LARS, A. 2004. Lactic Acid Bacteria: Classification and Physiology. En: Salminen, S.; Wright, A.; Ouwehand, A. eds. Lactic Acid Bacteria Microbiological and functional aspects. Ed. Board (New York U.S.A.). p.4-8. NARENDRANATH, N.; HYNES, S.; THOMAS, K.; INGLEDEW, W. 1997. Effects of Lactobacilli on yeast-catalyzed ethanol fermentations. Appl. and Environm. Microbiol. 63:4158-4163. PRAKASH, O.; VERMA, M.; SHARMA, P.; KUMAR, M.; KUMARI, K.; SINGH, A.; KUMARI, H.; JIT, S.; GUPTA, S.; KHANNA, M.; LAL, R. 2007. Polyphasic approach of bacterial classifification - An overview of recent advances. Indian J. Microbiol. 47:98-108. RIXON, J.; WARNER, P. 2003. Introduction: Background, revelant genetic techniques, and Terms. En: Wood, B.; Warner, P. eds. Genetics of lactic acid bacteria. New York. Chapter 1. p.3-15. ROVIRA, J.; ROVIRA, A. 1994. Factores de inhibición del crecimiento de bacterias ácido lácticas. Alimentaria: Revista de Tecnología e Higiene de los alimentos. 254:31-36. SINGH, S.; GOSWAMI, P.; SINGH, R.; HELLER, K. 2008. Application of molecular identification tools for Lactobacillus, with a focus on discrimination between closely related species: A review. LWT - Food Science and Technology. 42:448-457. SKINNER, K.; LEATHERS, T. 2004. Bacterial contaminants of fuel ethanol production. J. Industrial Microbiol. Biotechnol. 31:401-408. https://revistas.udca.edu.co/index.php/ruadc/article/download/702/716 https://revistas.udca.edu.co/index.php/ruadc/article/download/702/717 info:eu-repo/semantics/article http://purl.org/coar/resource_type/c_6501 http://purl.org/coar/resource_type/c_1843 info:eu-repo/semantics/publishedVersion http://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85 info:eu-repo/semantics/openAccess http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 Text Publication |
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La contaminación bacteriana es un problema continuo en procesos fermentativos, particularmente, en fermentaciones para producción de etanol, donde se utiliza melaza de caña o maíz como materia prima; estos contaminantes son bacterias ácido lácticas, predominando el género lactobacillus, principalmente. Estas bacterias crean un descenso constante del carbono disponible en la materia prima para la conversión a etanol. Compiten por factores de crecimiento necesarios para que la levadura realice su proceso fermentativo; así mismo pueden producir ácido láctico, el cual, inhibe el crecimiento de la levadura, generando una pérdida de dos moléculas de etanol por cada molécula de ácido láctico producido, disminuyendo la productividad y ocasionando pérdidas económicas. En este estudio, se colectaron muestras en una destilería colombiana de materia prima, levadura utilizada para el inóculo y cinco tanques de fermentación a diferentes tiempos, donde las bacterias ácido lácticas contaminantes fueron cuantificadas, aisladas y caracterizadas polifásicamente, utilizando métodos fenotípicos y genotípicos. Se emplearon pruebas bioquímicas de microbiología clásica, como método fenotípico y la técnica de pcr (reacción en cadena de la polimerasa), como método genotípico. Al cuantificarlas, se evaluó su comportamiento y su impacto en la eficiencia del proceso. Se observó recuentos altos de bacterias ácido lácticas en los tanques de fermentación; también se hallaron estas bacterias en la materia prima y levadura, lo que sugiere que el proceso tiene varias fuentes de contaminación. Al realizar la identificación polifásica, el género de bacterias más representativas fue lactobacillus.
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Bacterial contamination is a constant problem in fermentation processes, especially in the production of ethanol where sugar cane or corn molasses is used as raw material. The main contaminants are lactic acid bacteria, predominating, the genus Lactobacillus. These bacteria cause a decrease in the carbon source for the ethanol production. They compete for growth factors, needed by the yeast cells to generate the fermentation process. They also produce lactic acid, an inhibitor of yeast growth, which causes the loss of two molecules of ethanol per molecule of lactic acid produced. This causes a decrease in productivity, thus originating economic losses. In this study samples were collected from a Colombian distillery, from raw material, yeast used as inoculum and from five fermentation tanks at different moments. The lactic bacteria contaminants were quantified, isolated and characterized using phenotypic and genotypic methods. Biochemical tests of classical microbiology were used as the phenotypic method and PCR (Polimerase Chain Reaction) for the genotypic method. When quantifying the bacteria, their behavior and impact in efficiency was evaluated. High counts of lactic acid bacteria were observed in fermentation tanks. These bacteria were also found in the raw matter and in the yeast, suggesting the process has several sources of contamination. When performing the polyphasic characterization, the main contaminant was Lactobacillus.
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