Titulo:
Desarrollo de la técnica de interferón gamma (IFN-γ) para la detección de bovinos infectados con Listeria monocytogenes
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Sumario:
El objetivo de esta investigación fue estandarizar el protocolo técnico para la cuantificación de IFN-Ɣ de bovinos infectados con L. monocytogenes. El proyecto, se realizó en un conglomerado lechero del departamento de Cundinamarca. Se seleccionaron 169 animales, a los cuales, se les realizó aislamiento microbiológico, a partir de materia fecal, leche e hisopados vaginales, encontrando 53 positivos y 116 negativos; posteriormente, se tomaron muestras de sangre completa con heparina, para cuantificar, por ELISA, el IFN-ɣ producido después de la sensibilización de linfocitos con listeriolisina O y, finalmente, se realizó una comparación de los resultados obtenidos por aislamiento microbiológico con la cantidad de INF- Ɣ producido. De acuerdo... Ver más
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2015-06-30
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Desarrollo de la técnica de interferón gamma (IFN-γ) para la detección de bovinos infectados con Listeria monocytogenes Technical development of gamma interferon (IFN-γ) for detection of Listeria monocytogenes infected cattle El objetivo de esta investigación fue estandarizar el protocolo técnico para la cuantificación de IFN-Ɣ de bovinos infectados con L. monocytogenes. El proyecto, se realizó en un conglomerado lechero del departamento de Cundinamarca. Se seleccionaron 169 animales, a los cuales, se les realizó aislamiento microbiológico, a partir de materia fecal, leche e hisopados vaginales, encontrando 53 positivos y 116 negativos; posteriormente, se tomaron muestras de sangre completa con heparina, para cuantificar, por ELISA, el IFN-ɣ producido después de la sensibilización de linfocitos con listeriolisina O y, finalmente, se realizó una comparación de los resultados obtenidos por aislamiento microbiológico con la cantidad de INF- Ɣ producido. De acuerdo con el análisis estadístico, el promedio de la medición de IFN-Ɣ bovino de los animales negativos por aislamiento microbiológico fue de 12,75, con una varianza de 1199.93 y de los animales positivos por aislamiento microbiológico fue de 1,52, con una varianza de 316,65. El análisis de varianza y la prueba F de Fisher demostraron una relación estadísticamente significativa entre la cantidad de IFN-Ɣ con el aislamiento microbiológico de animales positivos y negativos (P<0,05). De acuerdo con los resultados obtenidos, la técnica de ELISA para IFN-Ɣ permite la detección indirecta de animales infectados con L. monocytogenes y la posibilidad de establecer medidas tempranas de control y de prevención. The objective of this research was to standardize the final technical protocol for quantification of IFN-γ in cattle infected with L. monocytogenes. The project was conducted in a dairy conglomerate of Cundinamarca. One hundred sixty nine animals were selected which underwent microbiological isolation from faeces, milk and vaginal swabs finding 116 positive animals and 53 negative, then, samples of whole blood with heparin were obtained to quantify IFN-γ produced after T linfocytes priming with listeriolysin O by ELISA and, finally, the results obtained by microbiological isolation were compared with the amount of IFN-γ produced. According to the statistical analysis the average measuring of INF-γ bovine in negative animals by microbiological isolation was12.75 with a variance of 1199.93 and the average measuring of INF-γ bovine in positive animals was 1.52 with a variance of 316.65. The analysis of variance and Fisher's F-test showed a statistically significant relationship between the amount of IFN-γ with microbiological isolation (P <0.05), the sensitivity of the IFN-γ technique was 73-100% and specificity 85-97.6%. According to the results obtained by ELISA IFN-γ, it allows indirect detection of animals infected with L. monocytogenes and the possibility of early action and prevention control. Carolina Gallego, Carolina Gallego, Manuel I. Azumendi, José L. Paipa, Jeimara Jaramillo, Diana Listeriosis interferón diagnóstico ganado de leche Listeriosis interferon diagnosis dairy cattle 18 1 Núm. 1 , Año 2015 :Revista U.D.C.A Actualidad & Divulgación Científica. Enero-Junio Artículo de revista Journal article 2015-06-30T00:00:00Z 2015-06-30T00:00:00Z 2015-06-30 application/pdf text/html Universidad de Ciencias Aplicadas y Ambientales U.D.C.A Revista U.D.C.A Actualidad & Divulgación Científica 0123-4226 2619-2551 https://revistas.udca.edu.co/index.php/ruadc/article/view/466 10.31910/rudca.v18.n1.2015.466 https://doi.org/10.31910/rudca.v18.n1.2015.466 spa https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ 163 170 BAETZ, A.; WESLEY, I.; STEVENS, M. 1996. The use of listeriolysin O in an ELISA, skin test and a lymphocyte blastogenesis assay on sheep experimentally infected with Listeria monocytogenes, Listeria ivanovii or Listeria innocua. Vet. Microbiol. (Netherlands). 51:151-159. BIO-X DIAGNOSTICS. 2008. Bio-X ELISA Kit for the quantitative of bovine gamma interferon (BIO K 093). (Quantitative sandwich test). Disponible desde Internet en: www.teknokroma.com (con acceso12/04/14). BORUCKI, M.; PEPPIN, J. 2003. Variation in biofilm formation among strains of Listeria monocytogenes. Appl. Environ. Microbiol. (USA). 69(12):7336-7342. BUBONJA, M.; WRABER, B.; BRUMINI, G.; GOBIN, I.; VELJKOVIC, D.; ABRAM, M. 2006. Systemic and local CC chemokines production in a murine model of Listeria monocytogenes infection. Mediators. Inflamm. (USA) 3:54202. CASTRO, I. 2010. Asociación de ganaderos deFacatativa. Referencia Personal. CHO, S. 2007. Current issues on molecular and immunological diagnosis of tuberculosis. Yonsei. Med. J. 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El objetivo de esta investigación fue estandarizar el protocolo técnico para la cuantificación de IFN-Ɣ de bovinos infectados con L. monocytogenes. El proyecto, se realizó en un conglomerado lechero del departamento de Cundinamarca. Se seleccionaron 169 animales, a los cuales, se les realizó aislamiento microbiológico, a partir de materia fecal, leche e hisopados vaginales, encontrando 53 positivos y 116 negativos; posteriormente, se tomaron muestras de sangre completa con heparina, para cuantificar, por ELISA, el IFN-ɣ producido después de la sensibilización de linfocitos con listeriolisina O y, finalmente, se realizó una comparación de los resultados obtenidos por aislamiento microbiológico con la cantidad de INF- Ɣ producido. De acuerdo con el análisis estadístico, el promedio de la medición de IFN-Ɣ bovino de los animales negativos por aislamiento microbiológico fue de 12,75, con una varianza de 1199.93 y de los animales positivos por aislamiento microbiológico fue de 1,52, con una varianza de 316,65. El análisis de varianza y la prueba F de Fisher demostraron una relación estadísticamente significativa entre la cantidad de IFN-Ɣ con el aislamiento microbiológico de animales positivos y negativos (P<0,05). De acuerdo con los resultados obtenidos, la técnica de ELISA para IFN-Ɣ permite la detección indirecta de animales infectados con L. monocytogenes y la posibilidad de establecer medidas tempranas de control y de prevención.
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The objective of this research was to standardize the final technical protocol for quantification of IFN-γ in cattle infected with L. monocytogenes. The project was conducted in a dairy conglomerate of Cundinamarca. One hundred sixty nine animals were selected which underwent microbiological isolation from faeces, milk and vaginal swabs finding 116 positive animals and 53 negative, then, samples of whole blood with heparin were obtained to quantify IFN-γ produced after T linfocytes priming with listeriolysin O by ELISA and, finally, the results obtained by microbiological isolation were compared with the amount of IFN-γ produced. According to the statistical analysis the average measuring of INF-γ bovine in negative animals by microbiological isolation was12.75 with a variance of 1199.93 and the average measuring of INF-γ bovine in positive animals was 1.52 with a variance of 316.65. The analysis of variance and Fisher's F-test showed a statistically significant relationship between the amount of IFN-γ with microbiological isolation (P <0.05), the sensitivity of the IFN-γ technique was 73-100% and specificity 85-97.6%. According to the results obtained by ELISA IFN-γ, it allows indirect detection of animals infected with L. monocytogenes and the possibility of early action and prevention control.
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